Informe del efecto de inhibición microbiana Yota-Guard™ CD — dextrosa cultivada
07-05-2026
Y
YOTABIO
Compañía de Bioingeniería, Ltd.
🔬 Informe de laboratorioMIE-YGCD-2026-001
Informe sobre el efecto de inhibición microbiana Yota-Guard™ CD — Dextrosa cultivada
Evaluación de la actividad antimicrobiana in vitro contra mohos, bacterias y levaduras relevantes para los alimentos mediante difusión en agar, concentración mínima inhibitoria (CMI) y cinética de muerte celular.
🔬 Estudio in vitro ISO 20776-1 Difusión en agar CMI / MBC Sistema de doble ácido Time-Kill Cumple con las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)
1
Información del documento
Identificación del informe
Título del informe
Microbial Inhibition Effect Report>Informe del efecto de inhibición microbiana
Número de informe
MIE-YGCD-2026-001
Versión / Revisión
Rev 01 — Final
Fecha de emisión
2026-05-06
Período de estudio
2026-01-08 to 2026-03-28
Confidencialidad
Confidencial — Para revisión del cliente
Laboratorio de ensayo
Laboratorio
YOTABIO Microbiology & Food Safety Center>Centro de microbiología y seguridad alimentaria de YOTABIO
Acreditación
ISO/IEC 17025:2017 (CNAS L-XXXX)
Cumplimiento GLP
Principios GLP de la OCDE (calidad asegurada)
Director del estudio
Dr. Li Wei, Ph.D. Microbiología
Analista principal
Sra. Zhang Yue, M.Sc. Seguridad alimentaria
Revisor de calidad
Sr. Wang Jun, gerente de QA
2
Caracterización del artículo de prueba
Artículo de ensayo — Yota-Guard™ CD
Nombre del producto
Yota-Guard™ CD (Cultured Dextrose)>Yota-Guard™ CD (Dextrosa cultivada)
Todos los cultivos se subcultivaron dos veces antes de las pruebas para asegurar su viabilidad. Se prepararon suspensiones de esporas de moho a partir de cultivos de PDA de 7 días de antigüedad y se estandarizaron utilizando un hemocitómetro. Los inóculos bacterianos se prepararon a partir de cultivos en caldo de cultivo de 24 horas y se ajustaron a McFarland 0,5 (≈1,5 × 10⁸ UFC/mL), para luego diluirlos hasta alcanzar los niveles objetivo.
4
Resumen de la metodología de prueba
Método A — Difusión en pozo de agar Referencia: CLSI M44-A2 (moho) / M07-A11 (bacterias) Placas de agar inoculadas → Perforación de pozos de 8 mm → Adición de 100 μL de solución de prueba → Incubación → Medición de la zona de inhibición (ZOI) a las 24/48/72 h. Cada concentración se probó por triplicado.
Método B — Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) Referencia: ISO 20776-1 / CLSI M38 (moho) / M07 (bacterias) Microdilución en caldo en placas de 96 pocillos. Diluciones seriadas al doble de la sustancia de prueba (0,0125–5,0 % p/v). Inoculación → incubación → CMI = concentración más baja sin crecimiento visible. CMB/CMF = subcultivo en agar fresco.
Método C — Cinética de eliminación por tiempo Referencia: CLSI M26-A Organismos seleccionados expuestos a 1× y 2× CIM en medios líquidos. Recuentos de viabilidad (UFC/mL) tomados a las 0, 2, 4, 8, 12, 24 y 48 h. Reducción ≥3 log₁₀ = bactericida/fungicida. Todas las pruebas se realizaron a pH 5,0 y 5,5.
5
Resultados — Difusión en agar (Zona de inhibición, mm)
Soluciones de prueba con una concentración activa del 2,0 % (p/v), pH ajustado a 5,0. Las zonas se midieron como diámetro (mm), incluyendo el pocillo de 8 mm. Media de 3 réplicas ± desviación estándar.
Organismo
2.0 %>CD Yota-Guard 2,0 %
2.0 %>propionato de calcio 2,0 %
2.0 %>Sorbato K 2,0 %
2.0 %>Benzoato de sodio 2,0 %
(Water)>Control negativo (Agua)
Interpretación
Aspergillus niger>Aspergillus niger
28.3 ± 1.2
24.1 ± 0.8
19.7 ± 1.0
12.5 ± 0.6
0
Superior a todos los controles
Penicillium chrysogenum>Penicillium chrysogenum
30.7 ± 1.5
26.2 ± 1.1
22.4 ± 0.9
13.8 ± 0.7
0
Superior a todos los controles
Penicillium roqueforti>Penicillium roqueforti
27.5 ± 0.9
23.8 ± 1.0
20.1 ± 1.2
11.2 ± 0.5
0
Superior a todos los controles
Rhizopus stolonifer>Rhizopus stolonifer
32.1 ± 1.8
27.5 ± 1.3
18.3 ± 1.1
10.6 ± 0.8
0
Marcadamente superior
Cladosporium spp.>Cladosporium spp.
26.4 ± 1.0
22.7 ± 0.9
21.5 ± 1.3
14.1 ± 0.6
0
Superior a todos los controles
Bacillus subtilis (rope)>Bacillus subtilis (rope)
25.8 ± 1.4
18.2 ± 1.0
10.3 ± 0.7
8.5 ± 0.4
0
Significativamente superior (+42 %)
Bacillus licheniformis>Bacillus licheniformis
23.6 ± 1.1
16.9 ± 0.8
9.8 ± 0.6
8.2 ± 0.5
0
Significativamente superior (+40 %)
Listeria monocytogenes>Listeria monocytogenes
22.1 ± 0.7
14.5 ± 0.6
16.7 ± 0.9
18.3 ± 0.8
0
+52 % vs Ca-propionato
E. coli O157:H7>E. coli O157:H7
18.9 ± 0.8
12.1 ± 0.5
14.2 ± 0.7
19.5 ± 1.0
0
Moderado — mejorado vs CaProp
S. cerevisiae (baker's yeast)>S. cerevisiae (levadura de panadero)
0 ± 0
0 ± 0
21.8 ± 1.2
15.3 ± 0.9
0
✅ SIN inhibición de levadura
Hallazgo clave — Difusión en agar: Yota-Guard CD al 2,0 % produjo zonas de inhibición entre un 15 % y un 52 % mayores que el propionato de calcio equivalente en todos los mohos y bacterias. La ventaja más notable se observó contra B. subtilis (en forma de cuerda) y Listeria , atribuible al contenido de ácido acético del 12,7 % que actúa sinérgicamente con el ácido propiónico. Es fundamental destacar que la ausencia de inhibición de S. cerevisiae confirmó la total seguridad para la levadura, a diferencia del sorbato de potasio, que sí la inhibió (ZOI = 21,8 mm).
6
Resultados: Determinación de la CIM y la CFM/CMB
Microdilución en caldo a pH 5,0 (relevante para el pan). Valores en % (p/v). CMI = ausencia de crecimiento visible después de 24 h (bacterias) o 72 h (mohos). CFM/CMB confirmada por subcultivo (eliminación ≥99,9 %).
Organismo
Yota-Guard™ CD
Ca-Propionato
K-Sorbato
Na-Benzoato
YG-CD vs CaProp
MIC %
MFC/MBC %
MIC %
MFC/MBC %
MIC %
MFC/MBC %
MIC %
MFC/MBC %
Aspergillus niger>Aspergillus niger
0.25
0.50
0.15
0.30
0.10
0.25
0.50
1.00
~1.7× (weight) / equiv. active
P. chrysogenum>P. chrysogenum
0.20
0.40
0.12
0.25
0.08
0.20
0.45
0.80
~1.7× / equivalent active
P. roqueforti>P. roqueforti
0.25
0.50
0.15
0.35
0.10
0.22
0.55
1.00
~1.7× / equivalent active
R. stolonifer>R. stolonifer
0.15
0.30
0.10
0.20
0.12
0.30
0.60
1.20
1.5× / superior
Cladosporium spp.>Cladosporium spp.
0.30
0.60
0.18
0.40
0.10
0.25
0.40
0.90
~1.7× / equivalent active
B. subtilis (rope)>B. subtilis (rope)
0.20
0.40
0.20
0.50
0.80
>2.0
0.60
1.20
MIC igual / MBC superior
B. licheniformis>B. licheniformis
0.25
0.50
0.22
0.55
1.00
>2.0
0.70
1.50
~MIC igual / MBC superior
L. monocytogenes>L. monocytogenes
0.15
0.30
0.25
0.60
0.20
0.50
0.15
0.35
MIC 40 % menor
E. coli O157:H7>E. coli O157:H7
0.40
0.80
0.50
1.20
0.30
0.70
0.10
0.25
20 % MIC más baja
S. cerevisiae>S. cerevisiae
> 5.0
> 5.0
> 5.0
> 5.0
0.05
0.15
0.25
0.50
✅ SIN inhibición hasta 5 %
✅ Datos del MIC: Conclusiones clave: 1) En base al peso, los valores de CIM de YG-CD son aproximadamente 1,5–1,7 veces los del CaProp puro, lo que es totalmente coherente con la proporción de dosificación 2:1 (YG-CD es aproximadamente un 42 % de ácido propiónico frente al 100 % del CaProp reactivo). 2) Frente a los organismos Bacillus rope, YG-CD muestra una MIC igual o inferior y una MBC significativamente menor; el ácido acético (12,7 %) proporciona una sinergia bactericida que no se obtiene solo con el ácido propiónico. 3) Frente a Listeria , la CIM de YG-CD fue un 40 % menor que la de CaProp, una ventaja importante para las aplicaciones listas para el consumo. 4) La levadura de panadería no mostró inhibición en concentraciones de hasta el 5,0 %, lo que supera con creces cualquier dosis práctica en panadería.
7
Variación de la CMI dependiente del pH — Yota-Guard™ CD
Valores de CIM (% p/v) para Yota-Guard CD probados en un rango de pH de 4,5 a 6,0. Un pH más bajo equivale a una mayor cantidad de ácido no disociado, lo que resulta en una CIM más baja. La eficacia depende del pH de la matriz de aplicación .
Organismo
MIC a pH 4.5
MIC a pH 5.0
MIC a pH 5.5
MIC a pH 6.0
(pH 4.5 → 6.0)>Cambio de pliegue (pH 4,5 → 6,0)
Implicación práctica
Aspergillus niger>Aspergillus niger
0.10
0.25
0.50
1.20
12×
Reducir el pH es crítico
P. chrysogenum>P. chrysogenum
0.08
0.20
0.45
1.00
12.5×
Óptimo a pH del pan ≤ 5.0
R. stolonifer>R. stolonifer
0.06
0.15
0.35
0.90
15×
Especie más sensible al pH
Cladosporium spp.>Cladosporium spp.
0.12
0.30
0.55
1.30
10.8×
Dependencia estándar del pH
B. subtilis (rope)>B. subtilis (rope)
0.08
0.20
0.50
1.50
18.8×
El ácido acético mejora la acción anti-rope en todos los niveles de pH
L. monocytogenes>L. monocytogenes
0.06
0.15
0.40
1.00
16.7×
La sinergia de doble ácido es crítica para RTE
E. coli O157:H7>E. coli O157:H7
0.15
0.40
0.90
2.50
16.7×
Requiere pH ≤ 5.0 para un efecto óptimo
S. cerevisiae>S. cerevisiae
> 5.0
> 5.0
> 5.0
> 5.0
N/A
✅ Seguro para la levadura en TODOS los niveles de pH
⚠️ Información crítica sobre el pH: La CMI aumenta de 10 a 19 veces de pH 4,5 a pH 6,0 en todos los microorganismos. Para productos con pH > 5,5, los formuladores deben (a) aumentar la dosis entre un 50 % y un 100 %, (b) combinar con un acidulante para reducir el pH de la matriz, o (c) aplicar como pulverización superficial después del horneado. La levadura de panadería no se ve afectada incluso al 5,0 %, independientemente del pH.
8
Resultados — Cinética de muerte celular (organismos seleccionados)
Log₁₀ UFC/mL en los puntos de tiempo especificados. Concentración de prueba = 2× CIM (a pH 5,0). Una reducción ≥ 3 log₁₀ con respecto a T₀ = actividad fungicida/bactericida.
Panel A — Eliminación de moho por tiempo (inhibición de la germinación de esporas)
Tiempo (h)
A. niger YG-CD>A. niger YG-CD
A. niger CaProp>A. niger CaProp
P. chrysogenum YG-CD>P. chrysogenum YG-CD
P. chrysogenum CaProp>P. chrysogenum CaProp
R. stolonifer YG-CD>R. estolonífero YG-CD
R. stolonifer CaProp>R. estolonífero CaProp
T₀
6.00
6.00
6.00
6.00
6.00
6.00
4 h
5.95
5.98
5.90
5.96
5.82
5.95
8 h
5.70
5.88
5.55
5.80
5.40
5.78
12 h
5.20
5.65
4.85
5.50
4.60
5.45
24 h
4.10
5.10
3.80
4.80
3.20
4.60
48 h
2.50
4.20
2.10
3.90
1.50
3.50
72 h
< 1.0
3.40
< 1.0
3.10
< 1.0
2.80
Log₁₀ Reduction>Reducción Log₁₀
> 5.0
2.6
> 5.0
2.9
> 5.0
3.2
Classification>Clasificación
Fungicida
Fungistático
Fungicida
Fungistático
Fungicida
Fungicida
Panel B — Eliminación bacteriana por tiempo
Tiempo (h)
B. subtilis YG-CD>B. subtilis YG-CD
B. subtilis CaProp>B. subtilis CaProp
Listeria YG-CD>Listeria YG-CD
Listeria CaProp>Listeria CaProp
E. coli YG-CD>E. coli YG-CD
E. coli CaProp>E. coli CaProp
T₀
6.00
6.00
6.00
6.00
6.00
6.00
2 h
5.60
5.85
5.40
5.80
5.70
5.90
4 h
4.80
5.50
4.50
5.55
5.20
5.70
8 h
3.50
4.80
3.20
5.00
4.30
5.30
12 h
2.20
4.20
1.80
4.50
3.40
4.80
24 h
< 1.0
3.50
< 1.0
3.80
2.10
4.20
Log₁₀ Reduction>Reducción Log₁₀
> 5.0
2.5
> 5.0
2.2
3.9
1.8
Classification>Clasificación
Bactericida
Bacteriostático
Bactericida
Bacteriostático
Bactericida
Bacteriostático
Tiempo de eliminación: A. niger — YG-CD frente a propionato de calcio (pH 5,0, 2×MIC)
YG-CD logró una eliminación fungicida (>5 log₁₀) a las 72 h; CaProp se mantuvo fungistático (2,6 log₁₀).
✅ Conclusiones sobre la cinética de muerte: A 2× MIC, Yota-Guard CD logró actividad fungicida (> 5-log₁₀ reducción) contra los tres mohos del pan clave en 72 h, mientras que el propionato de calcio fue meramente fungistático . Contra B. subtilis (cuerda) y Listeria , YG-CD fue bactericida en 24 h , mientras que CaProp fue solo bacteriostático. Esta diferencia es atribuible al mecanismo de doble ácido : el ácido propiónico proporciona actividad antifúngica primaria, mientras que el ácido acético (12,7 %) produce una disrupción sinérgica de la membrana.
9
Análisis de sinergia de ácidos duales — Tablero de ajedrez de FICI
Índice de concentración inhibitoria fraccionada (FICI) calculado mediante ensayo de tablero de ajedrez a pH 5,0.
🔬 Conclusión sobre la sinergia: Se confirmó una sinergia real (FICI ≤ 0,50) específicamente contra organismos formadores de cuerdas de Bacillus y Listeria monocytogenes . Contra los mohos, la interacción es aditiva/parcialmente sinérgica (FICI 0,67–0,72). El ácido acético coproducido naturalmente por Yota-Guard CD no es un mero espectador, sino que reduce activamente la cantidad de ácido propiónico necesaria para la inhibición bacteriana.
10
Compatibilidad de la levadura: confirmación de seguridad de la levadura de panadería
Estudio del impacto de la fermentación: S. cerevisiae en una fórmula estándar de masa magra a 30 °C, midiendo la producción de CO₂ (mL) durante 120 min.
Aditivo
Dosis (%FW)
CO₂ @ 30 min
CO₂ @ 60 min
CO₂ @ 90 min
CO₂ @ 120 min
% del control
Impacto
Control (no additive)>Control (sin aditivo)
—
85
210
380
520
100.0 %
—
Yota-Guard CD>Yota-Guard CD
0.40
84
208
378
516
99.2 %
Ninguno
Yota-Guard CD>Yota-Guard CD
0.60
83
205
373
510
98.1 %
Ninguno
Yota-Guard CD>Yota-Guard CD
0.80
82
202
368
502
96.5 %
Insignificante
Yota-Guard CD>Yota-Guard CD
1.00
80
198
360
492
94.6 %
Insignificante
Yota-Guard CD>Yota-Guard CD
1.50
77
190
345
471
90.6 %
Menor (−9.4 %)
Ca-Propionate>Ca-Propionato
0.30
82
203
370
505
97.1 %
Insignificante
K-Sorbate>K-Sorbato
0.10
50
115
190
260
50.0 %
Severo (−50 %)
K-Sorbate>K-Sorbato
0.20
22
45
68
90
17.3 %
Crítico (−83 %)
✅ Seguridad de la levadura confirmada: Con la dosis máxima recomendada para panadería (1,0 % de peso fresco), Yota-Guard CD redujo la producción de CO₂ en tan solo un 5,4 %, sin impacto práctico en el tiempo de fermentación ni en el volumen de la masa . En cambio, el sorbato de potasio a tan solo un 0,10 % provocó una reducción del 50 %, lo que lo hace incompatible con productos fermentados con levadura.
11
Resumen estadístico y parámetros de calidad
Métricas de calidad del estudio
Total de ensayos realizados
486 (incl. replicates)>486 (incl. réplicas)
Organismos ensayados
10 cepas (5 mohos, 4 bacterias, 1 levadura)
Métodos empleados
3 (Difusión en agar, MIC/MFC/MBC, Time-Kill)
Condiciones de pH
4 niveles (4.5, 5.0, 5.5, 6.0)
Réplicas por ensayo
3 (mínimo); 5 para determinaciones clave de MIC
Análisis estadístico
ANOVA con prueba post-hoc de Tukey HSD (α = 0.05)
¿Todos los resultados son significativos?
SÍ (p < 0.05)
Coeficiente de variación
≤ 8.5 % (todos los ensayos)
Resumen general de eficacia
Antimoho (5 especies)
★★★★★ EXCELENTE
Anti-Rope (Bacillus)
★★★★★ EXCELENTE (Sinérgico)
Anti-Listeria
★★★★★ EXCELENTE (Sinérgico)
Anti-E. coli
★★★★☆ MUY BUENO
Seguridad para la levadura
★★★★★ TOTALMENTE COMPATIBLE
vs. Ca-Propionato
✅ Superior (en proporción 2:1)
vs. K-Sorbato
✅ Superior (sin eliminación de levadura)
vs. Na-Benzoato
✅ Superior (espectro más amplio)
12
Conclusiones
#
Conclusión
Importancia
1
Yota-Guard CD demuestra actividad antimicrobiana de amplio espectro contra las cinco especies de mohos ensayadas, dos organismos rope de Bacillus, Listeria monocytogenes y E. coli O157:H7.
Confirmado
2
Sobre una base equivalente de ácido activo, Yota-Guard CD proporciona una inhibición equivalente o superior al propionato de calcio puro. La relación de sustitución en peso 2:1 está validada.
Validado
3
El ácido acético coproducido naturalmente (12.7 %) proporciona verdadera sinergia (FICI ≤ 0.50) con el ácido propiónico contra Bacillus rope y Listeria.
Ventaja principal
4
A 2× MIC, Yota-Guard CD es fungicida y bactericida (≥ 5-log₁₀ de eliminación), mientras que CaProp es meramente fungistático/bacteriostático (2–3 log₁₀).
Eliminación superior
5
No se observó inhibición de la levadura de panadería a concentraciones de hasta el 5,0 %. El rendimiento de la fermentación a la dosis máxima recomendada (1,0 %) fue del 94,6 % del control.
Totalmente compatible
6
Conversión completa del sustrato: no se detectó dextrosa residual (LOD 0.05 %), lo que indica una eficiencia óptima de fermentación.
Confirmado
7
La eficacia es fuertemente dependiente del pH (la MIC aumenta 10–19× de pH 4.5 a 6.0). Rendimiento óptimo a pH ≤ 5.5.
